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All issues Volume 80 / No 5 (September-October 2000) Lait, 80 5 (2000) 517-526 Abstract
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Issue
Lait
Volume 80, Number 5, September-October 2000
Page(s) 517 - 526
DOI https://doi.org/10.1051/lait:2000142
\n This email address is being protected from spambots. You need JavaScript enabled to view it. ), CBLU, University of Leeds * revised and updated by: Marcus Hennecke, Ross Moore, Herb Swan * with significant contributions from: Jens Lippmann, Marek Rouchal, Martin Wilck and others --> DOI: 10.1051/lait:2000142

Lait 80 (2000) 517-526

Plasmin digestion of bovine $\beta$-casein dephosphorylated with one protein phosphatase type 2A purified from Yarrowia lipolytica

Pascale Joliveta - Isabel Queiroz Macedob - Min Wua - Jean-Claude Meuniera

aLaboratoire de Chimie Biologique, INRA, INA PG, Centre de Biotechnologies Agro-Industrielles, 78850 Thiverval-Grignon, France
bChemistry Department, University of Aveiro, 3810 Aveiro, Portugal

(Received 26 July 1999; accepted 16 May 2000)

Abstract:

Bovine $\beta$-casein was dephosphorylated by the catalytic sub-unit of a type 2A protein phosphatase (PP2Ac) purified from the yeast Yarrowia lipolytica. Complete dephosphorylation was obtained after 24 to 30 h in Tris buffer (pH 7.5). On the contrary, the activity of PP2Ac was largely inhibited (80%) in the presence of 13 mmol$\cdot$L-1 sodium citrate (pH 6.8). After dephosphorylation of $\beta$-casein, plasminolysis was increased and more 3% TCA-soluble peptides were obtained (30% increase). Dephosphorylation led to the disappearance of the f 29-105/107 peptide and to the appearance of a new non-phosphorylated 8 200 g$\cdot$mol-1 peptide, suggested to be f 33-105/107 originated from the middle part of the $\beta$-casein sequence and obtained upon plasmin cleavage of the Lys32-Phe33 peptide bond.


Keywords: $\beta$-casein / dephosphorylation / protein phosphatase / Yarrowia lipolytica / plasmin

Résumé:

Hydrolyse par la plasmine de la caséine $\beta$ bovine déphosphorylée par une protéine phosphatase de type 2A purifiée chez Yarrowia lipolytica. La caséine $\beta$ peut être déphosphorylée par la sous-unité catalytique d'une protéine phosphatase de type 2A purifiée chez la levure Yarrowia lipolytica. La déphosphorylation complète est obtenue en 24 à 30 h en tampon Tris (pH 7.5). À l'inverse, elle est largement inhibée par le citrate de sodium 13 mmol$\cdot$L-1 à pH 6.8 (80 % d'inhibition). Après déphosphorylation, la plasminolyse de la caséine $\beta$ est augmentée puisque l'on observe une production supplémentaire de 30 % de peptides solubles dans le TCA à 3 %. La déphosphorylation se traduit par la disparition du peptide f 29-105/107 et l'apparition d'un nouveau peptide non phosphorylé de 8 200 g$\cdot$mol-1. Il pourrait s'agir du peptide f 33-105/107 provenant de la partie centrale de la séquence protéique de la caséine $\beta$ et obtenu par attaque de la liaison peptidique Lys32-Phe33.


Mots clé : caséine b / déphosphorylation / protéine phosphatase / Yarrowia lipolytica / plasmine

Correspondence and reprints: Pascale Jolivet
tel. (33) 1 30 81 54 67; fax: (33) 1 30 81 53 73; e-mail: This email address is being protected from spambots. You need JavaScript enabled to view it.

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