Lait 62 (1982) 338-349
DOI: 10.1051/lait:1982617-62023

Purification et quelques caractéristiques moléculaires du " composant-3 " des protéose-peptones

D. PAQUET, C. ALAIS and F. AUBERT

Laboratoire de Biochimie Appliquée, Faculté des Sciences, Université de Nancy I, B.P. 239 - 54506 Vandoeuvre-les-Nancy

Abstract - Purification and some molecular characteristics of the "component-3" of proteose-peptones
The proteose-peptones were isolated from skimmilk or acid whey by mean of three methods, then analyzed by polyacrylamide gel electrophoresis. They showed almost identical densitometric diagrams. Only the band corresponding to component-3 gave characteristic colour with the Schiff reagent. The hydrophobic interaction chromatography on phenyl-sepharose CL 4B column was a suitable method to separate the major proteose-peptone components. A further gel filtration on Sephacryl S 200 allowed us to purify the component-3. The amino acid analysis showed that the component-3 contained less proline but more serine and glycine than the original proteose-peptones. Polyacrylamide gel electrophoresis in the presence of sodium dodecyl sulphate gave a molecular weight value near 22 000. The N-terminal residue was found to be serine by dansylation. The phosphorus content was near 1,1 %.

Résumé - Les protéose-peptones étaient isolées de lait cru ou de lactosérum acide par trois méthodes, puis examinées par électrophorèse sur gel de polyacrylamide. Elles présentaient des profils densitométriques presque identiques. Seule, la bande correspondant au composant-3 était colorée par le réactif de Schiff. La chromatographie liquide d'interactions hydrophobes sur colonne de phenyl-sepharose CL 4B était une bonne méthode pour fractionner les protéose-peptones en leurs composants principaux. Une chromatographie supplémentaire sur gel de séphacryl S 200 permettait de purifier le composant-3. L'analyse des acides aminés montrait que ce composant contenait moins de proline mais plus de sérine et de glycine que les protéose-peptones d'origine. L'électrophorèse sur gel de polyacrylamide en présence de dodecyl sulfate de sodium donnait un poids moléculaire voisin de 22 000. La sérine était identifiée comme acide aminé N-terminal par dansylation. Le taux de phosphore était voisin de 1,1 ° / o.

Key words: Proteose-peptones / Fractionation / Component-3 / Purification / Composition

Mots clés : Protéose-peptones / Composant-3 / Fractionnement / Purification / Composition