Lait 71 (1991) 259-273
DOI: 10.1051/lait:1991320

Isolement et caractérisation de la fraction hydrophobe des protéose-peptones des laits bovin, ovin et caprin

A. Mati^a, J.M. Girardet^a, D. Xenakis^b, D. Xenakis^c and G. Linden<sup>a

a</sup>  Laboratoire de biochimie appliquée; associé à L'INRA, BP239, 54506 Vandoeuvre-les-Nancy Cedex, France
^b  Université d'agriculture d'Athènes, laboratoire de technologie laitière, Grèce
^c  Adresse actuelle : ELAIS, 74 Achinon-Pireos Str 18547 Piraeus, Grèce

(Reçu le 9 octobre 1990; accepté le 15 décembre 1990)

Abstract - Isolation and characterization of proteose-peptone hydrophobic fractions of cow's, ewe's and goat's milk
The proteose-peptone extraction and purification procedure, largely utilized until now for cow's milk, was adapted for ewe's and goat's milk. The proteose-peptone fractions which contain component-3 were isolated by hydrophobic interaction chromatography. The extraction yield was increased by the improvement of the procedure. Physico-chemical behaviours of protein fractions (total proteose-peptone and their hydrophobic components) were studied. The native polyacrylamide gel electrophoresis (native PAGE) showed that ewe's and goat's component-3 migrations were lower than those of their cow's milk counterpart. The electrophoretic patterns of the hydrophobic fractions obtained in denaturating conditions with sodium dodecyl sulfate and 2-mercaptoethanol (SDS-PAGE) had 2 major common bands corresponding to glycoproteins of 18 000 and 28 000 Da. These polypeptides were implicated in the high molecular weight aggregates which were revealed by gel permeation chromatography (Sephacryl S200 and Superose 12 columns). Two-dimensional electrophoresis showed high similarity among the different protein fractions regarding their isoelectric points and molecular weights. The chemical composition (amino acids, carbohydrates, phosphorus) also showed analogies between the proteose-peptone fractions belonging to the 3 milk species.

Résumé - Le protocole d'isolement des protéose-peptones, largement utilisé jusque là pour le lait de vache, a été adapté et appliqué aux laits de brebis et de chèvre. Les fractions de ces protéines contenant le composant-3 sont isolées par chromatographie d'interactions hydrophobes. Les rendements d'extraction sont améliorés par optimisation de ce protocole. Le comportement physicochimique des fractions protéiques (protéose-peptones totales et leurs fractions hydrophobes) est étudié. L'électrophorèse en gel de polyacrylamide en milieu non dissociant (PAGE native) montre une plus faible mobilité du composant-3 des laits ovin et caprin par rapport à leur homologue du lait bovin. En milieu dissociant, en présence de dodécylsulfate de sodium et du 2-mercaptoéthanol (PAGE-SDS), les profils électrophorétiques des fractions hydrophobes ont en commun 2 bandes principales correspondant à des glycoprotéines de 18 000 et 28 000 Da. Ces polypeptides sont impliqués dans les agrégats de hauts poids moléculaires mis en évidence par chromatographie de perméation sur gel (colonnes de Séphacryl S200 et Superose 12). L'électrophorèse bidimensionnelle a montré une bonne similitude entre les fractions protéiques des laits des 3 espèces, concernant leurs points isoélectriques et leurs poids moléculaires. La composition chimique (acides aminés, glucides, phosphore) a montré également des analogies entre les fractions protéose-peptones des laits provenant des espèces laitières étudiées.

Key words: proteose-peptone / hydrophoblc fraction / cow milk / ewe milk / goat milk

Mots clés : protéose-peptone / fraction hydrophobe / lait / brebis / chèvre