DOI: 10.1051/lait:2001126

Lait 81 (2001) 227-235

Développement d'un milieu sélectif pour le dénombrement des bifidobactéries dans les laits fermentés

Christine Bonaparte^a, Günter Klein^b, Wolfgang Kneifel^a and Gerhard Reuter<sup>c

a</sup>  Institut de Recherche Laitière et de Bactériologie, Université Agronomique, Gregor Mendel Strasse 33, 1180 Vienne, Autriche
^b  Institut Fédéral pour la Protection des Consommateurs et Médecine Vétérinaire, Berlin, Allemagne
^c  Institut de l'Hygiène et Technologie de la viande, Université libre de Berlin, Allemagne

Abstract
Development of a selective culture medium for the enumeration of bifidobacteria in fermented milks. The use of selective culture media is necessary to demonstrate the presence of bifidobacteria in European fermented milks, since Lactobacillus (L.) acidophilus, L. delbrueckii ssp. bulgaricus and Streptococcus (S.) thermophilus usually dominate the flora in these products. But a fully selective medium suppressing these microorganisms does not exist as yet. Therefore, the selectivity and productivity of three media were tested qualitatively and quantitatively: DIC (pH 6.8) and BEE (pH 5.0) were based on TPY and Columbia agar with dicloxacillin and propionic acid respectively, as inhibitory agents. A new combination, DP (pH 6.8), was created on the base of Columbia agar with both propionic acid and dicloxacillin as additives. The elective medium BIO, which is based on RCM agar supplemented with lactose and human erythrocyte concentrate was used as control medium. The samples tested were either single strains of Bifidobacterium spp., L. acidophilus, L. delbrueckii ssp. bulgaricus and S. thermophilus or mixte cultures in form of starter cultures or fermented milks. DIC allowed a good growth of bifidobacteria as well as L. acidophilus. On BEE bifidobacteria as well as L. delbrueckii ssp. bulgaricus grew irregularly. DP allowed a quantitatively sufficient growth of bifidobacteria and prevented the growth of accompanying L. acidophilus, L. delbrueckii ssp. bulgaricus and S. thermophilus strains. Therefore, DP is advantageous over DIC and BEE and can be recommended for the selective isolation of bifidobacteria from starter cultures and from different fermented milks products in Europe.

Résumé
L'importance sur le marché européen des laits fermentés aux vertus présumées probiotiques augmente régulièrement. La flore bactérienne dans le produit est souvent dominée par Streptococcus (S.) thermophilus, Lactobacillus (L.) delbrueckii ssp. bulgaricus et L. acidophilus, alors que les bifidobactéries ne sont présentes qu'en faible concentration. Leur dénombrement nécessite donc l'utilisation d'un milieu sélectif. Or il n'existe à ce jour aucune méthode standard de dénombrement des bifidobactéries. Trois milieux de culture ont donc été testés pour leur sélectivité et productivité envers les bifidobactéries : le milieu DIC (pH 6,8) est basé sur la gélose TPY contenant de la dicloxacilline comme agent inhibiteur et le milieu BEE (pH 5,0) est une gélose Columbia supplémentée en acide propionique. Le nouveau milieu DP (pH 6,8), a comme base la gélose Columbia additionnée d'acide propionique et de dicloxacilline comme agents inhibiteurs. Les bifidobactéries se développent sur les 3 milieux. En revanche alors que DP inhibe la croissance de L. acidophilus, L. delbrueckii ssp. bulgaricus et S. thermophilus, DIC n'a pas d'effet inhibiteur sur L. acidophilus et L. delbrueckii ssp. bulgaricus se multiplie parfois sur BEE. Le milieu DP peut être recommandé pour l'isolement sélectif des bifidobactéries provenant de laits fermentés.

Key words: bifidobacteria / selective medium / fermented milk / lactic acid bacteria

Mots clés : bifidobactérie / milieu sélectif / lait fermenté / bactérie lactique

Correspondence and reprints: Christine Bonaparte Tél. : (43) 1 476546121 ; fax : (43) 1 4789114 ; e-mail : cbonapar@edv1.boku.ac.at

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