Free Access
Volume 80, Number 5, September-October 2000
Page(s) 491 - 501
DOI: 10.1051/lait:2000140

Lait 80 (2000) 491-501

Purification and characterization of an intracellular esterase from Propionibacterium freudenreichii ssp. freudenreichii ITG 14

Evangellia Kakariari - Marina D. Georgalaki - George Kalantzopoulos - Effie Tsakalidou

Laboratory of Dairy Research, Department of Food Science and Technology, Agricultural University of Athens, Iera Odos 75, 118 55 Athens, Greece

(Received 17 December 1999; accepted 3 May 2000)


An intracellular esterase from Propionibacterium freudenreichii ssp. freudenreichii ITG 14 was purified by anion exchange and gel filtration chromatography. The enzyme had a molecular weight of 47 400 g$\cdot$mol-1 as determined by gel filtration chromatography, with an optimum activity on $\alpha$-naphthyl-acetate at pH 6.0 and at 65 $^\circ$C, with $K_{\rm M}$ = 1.2 mmol$\cdot$L-1. The esterase hydrolyzed synthetic substrates of low molecular weight (C2-C4), and among triglycerides only triacetin. Sulfhydryl group reagents and metal chelators had limited or no effect on enzyme activity; highest inhibition was observed with phenylmethyl sulfonyl fluoride (PMSF).

Keywords: Propionibacterium freudenreichii ssp. freudenreichii / esterase / purification / characterization


Purification et caractérisation d'une estérase intracellulaire de Propionibacterium freudenreichii ssp. freudenreichii ITG 14. Une estérase intracellulaire extraite de Propionibacterium freudenreichii ssp. freudenreichii ITG 14 a été purifiée par chromatographie échangeuse d'anions et chromatographie d'exclusion de taille. L'enzyme avait une masse moléculaire de 47 400 g$\cdot$mol-1, comme déterminé par chromatographie d'exclusion de taille, et elle avait une activité maximale sur le substrat $\alpha$-naphthyl-acétate à pH 6,0 et 65 $^\circ$C, avec $K_{\rm M}$ = 1,2 mmol$\cdot$L-1. L'estérase dégradait des substrats synthétiques de faible poids moléculaire (C2-C4), et parmi les triglycérides seulement la triacétine. Des groupements sulfydryles et des chélateurs de métaux n'avaient aucun effet ou un effet limité sur l'activité enzymatique ; la plus forte inhibition a été observée lors de l'utilisation du PMSF.

Mots clé : Propionibacterium freudenreichii ssp. freudenreichii / estérase / purification / caractérisation

Correspondence and reprints: Effie Tsakalidou
tel. (30) 1 529 4676; fax: (30) 1 529 4672; e-mail:

Copyright INRA, EDP Sciences

Current usage metrics show cumulative count of Article Views (full-text article views including HTML views, PDF and ePub downloads, according to the available data) and Abstracts Views on Vision4Press platform.

Data correspond to usage on the plateform after 2015. The current usage metrics is available 48-96 hours after online publication and is updated daily on week days.

Initial download of the metrics may take a while.