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Lait
Volume 79, Number 6, 1999
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Page(s) | 567 - 575 | |
DOI | https://doi.org/10.1051/lait:1999646 |
DOI: 10.1051/lait:1999646
Multiple fluorescence labelling of proteins, lipids and whey in dairy products using confocal microscopy
Sophie Herberta, b, Brigitte Bouchetb, Alain Riaublanca, Eric Dufoura, c and Daniel J. Gallantba Unité d'étude des interactions des molécules alimentaires, Inra, BP 71627, 44316 Nantes cedex 3, France
b Unité de recherches sur les polysaccharides : leurs organisations et interactions, Inra, BP 71627, 44316 Nantes cedex 3, France
c Département qualité et économie alimentaires, Enita de Clermont-Ferrand, 63370 Lempdes, France
(Received 24 March; accepted 22 July 1999)
Abstract - Texture optimisation of dairy products is a major aim for manufacturers. A better knowledge of the structure and spatial organisation of their main components would allow the optimisation of their texture. In this study, using confocal scanning laser microscopy, a multiple fluorescent labelling of proteins, lipids and whey was developed to visualise these main components simultaneously in dairy products. Different extrinsic fluorescent probes were tested by confocal microscopy and fluorescence spectroscopy. Fuchsin acid, Bodipy® 665 / 676 and DM-NERF were selected to label proteins, lipids and whey, respectively. Methods for selecting stable and specific fluorescent probes and for obtaining the multiple fluorescent labelling are presented. An application example on a dairy gel is also shown. © Inra / Elsevier, Paris.
Résumé - Colocalisation des protéines, des lipides et du lactosérum dans les produits laitiers par microscopie confocale
L'optimisation de la texture des produits laitiers est un enjeu majeur pour les industries. Une meilleure connaissance de la structure et de l'organisation spatiale des principaux constituants de ces produits permettrait une optimisation de leur texture. Dans cette étude, réalisée à l'aide d'un microscope confocal à balayage laser, un marquage fluorescent spécifique des protéines, des lipides et du lactosérum a été développé pour localiser simultanément ces principaux composés dans des produits laitiers. Différentes sondes extrinsèques ont été testées par microscopie confocale et spectroscopie de fluorescence. L'acide fuchsin, le Bodipy® 665 / 676 et le DM-NERF ont été sélectionnés pour marquer respectivement les protéines, les lipides et le lactosérum. La démarche utilisée pour sélectionner les différentes sondes stables et spécifiques et pour réaliser la colocalisation sont détaillées. Un exemple d'application sur un gel laitier est également présenté. © Inra / Elsevier, Paris.
Key words: microscopy / fluorescence / protein / lipid / curd
Mots clés : microscopie / fluorescence / protéine / lipide / caillé
Corresponding author: Daniel J. Gallant gallant@nantes.inra.fr