Application d'un réactif de transparisation du lait au dénombrement de bactéries

Abstract - APPLICATION OF TRANSPARISATION TO ENUMERATE MILK MICROORGANISMS
Milk is naturally opaque since it contains fat globules and calcium phosphocaseinates. Thus the number of milk microorganisms can not be estimated by direct optical methods. In order to make milk transparent it was treated with a mixture of n-butylamine / cyclohexanone / triton X-100 in the ratio 2:1:1 at 37° C and at pH 11.3.
When milk is placed in contact with this dissolving mixture, it becomes clear as a resuit of the total dissolution of its colloïdal components. For optical measurement of the voltage at 632,8 nm we used a Behring Laser nephelemeter in which the light source is a Helium-Neon laser; a type 602 Perkin-Elmer molecular absorption spectrometer was used to measure optical density at 650 nm.
As reference methods the standard cell dry weight and micro-organism Petri dishes count methods were chosen. Voltage values and optical density values were obtained for every bacterial strain studied in Tris buffer 0.025 M at pH 7.0. Theses values were obtained before and after treatment with the dissolving mixture and could be plotted against colony forming units (C.F.U. / mL) and against cell dry weight (in mg / mL).
This new method is easy, repeatable and allows a rapid estimation of milk germs

Résumé - Après addition du mélange dissolvant n-butylamine, cyclohexanone et triton X-100, le lait perd sa turbidité naturelle du fait de la dissolution complète de ses constituants colloïdaux. Ce traitement permet de le soumettre directement aux méthodes optiques de détection de micro-organismes. Les mesures faites au spectromètre d'absorption moléculaire et au néphélémètre laser nous permettent de tracer respectivement des courbes de tension et de densité optique en fonction du poids sec des cellules (mg / mL) et en fonction du nombre de germes par mL exprimés en unités formant colonies (U.F.C. / mL). Cette méthode de détection est simple ; elle permet d'évaluer rapidement le nombre de germes présents dans le lait ; elle est d'une bonne répétabilité