Contamination of human whole casein by whey proteins. Quantitative aspects

Abstract - Human whole casein is always contaminated by whey proteins when prepared by acid precipitation (Nagasawa et al., 1974). This leads to difficult fractionation and may lead to over-estimation of the casein content of human milk. Quantification of the main contaminant whey proteins : Lactoferrin (LF), Secretory Immunoglobulins A (sIgA), Serum Albumin (SA) was carried out immunologically in human whole caseins prepared from the same milk by acid precipitation, ammonium sulphate fractionation ([NH₄]₂SO4 casein) and molecular sieving on 4 different gels (Sephacryl S200, Ultrogel AcA 54, Bio-Gels P100 and A-0.5m). Only sIgA and LF (69 and 32 mg / g, respectively) were found in acid casein. The same contaminants were detected, at much lower levels, in (NH₄)₂SO4 casein (10 and 4 mg / g, respectively). The 4 casein fractions obtained by molecular sieving contained 20 to 25 % (v / v) whey proteins. However this contamination was due almost only to sIgA in the Sephacryl S200 fraction. The use of this last technique followed by ammonium sulphate fractionation should give an almost whey protein-free casein.

Résumé - La caséine entière humaine préparée par précipitation du lait à pH acide est toujours contaminée par des protéines du lactosérum (Nagasawa et al., 1974). Ceci conduit à un fractionnement difficile et peut entraîner une surestimation du contenu caséique du lait humain. La quantification des principales protéines du lactosérum présentes : Lactoferrine (LF), Immunoglobulines sécrétaires (sIgA), Sérum Albumine (SA), a été réalisée immunologiquement sur des caséines entières humaines préparées à partir d'un même lait de mélange par des techniques différentes : précipitation acide, fractionnement par le sulfate d'ammonium (caséine [NH₄]₂SO4), tamisage moléculaire sur 4 gels différents (Sephacryl S200 ; Ultrogel AcA 54 ; Bio-Gels P100 et A-0.5m). Seules les sIgA et la LF étaient présentes dans la caséine acide (69 et 32 mg / g, respectivement). Les mêmes contaminants étaient détectés dans la caséine (NH₄)₂SO4, mais à des taux très nettement inférieurs (10 et 4 mg / g, respectivement). Les fractions caséiques obtenues par tamisage moléculaire contenaient de 20 à 25 % de protéines du lactosérum. Cependant, cette contamination étant essentiellement due aux sIgA dans la fraction issue du Sephacryl S200, l'utilisation d'un tel support suivi d'un fractionnement au sulfate d'ammonium peut permettre l'obtention d'une caséine dépourvue de protéines du lactosérum.