Lait 86 (2006) 127-140
DOI: 10.1051/lait:2005044

The application of flow cytometry in determining the bacteriological quality of raw sheep's milk in Slovakia

Martin Tomáska¹, Gertraud Suhren², Oto Hanus³, Hans-Georg Walte², Anna Slottová¹ and Margita Hofericová<sup>1

1</sup>  TL Examinala, Výskumný ústav mliekárenský, a.s., Dlhá 95, 010 01 Zilina, Slovakia
²  Federal Research Centre for Nutrition and Food - location Kiel, Hermann-Weigmann-Strasse 1, 24103 Kiel, Germany
³  Výzkumný ústav chovu skotu, s.r.o., Rapotín 267, 788 13 Vikýøovice, Czech Republic

(Received 25 February 2005 - Accepted 11 October 2005 - Published online 10 February 2006)

Abstract
In this study enumeration of bacterial cells in raw sheep's bulk milk by an automated flow cytometry method (Bactoscan FC) was evaluated. The results were discussed with respect to the results obtained by the analysis of cow's milk. Within-laboratory reproducibility, which depended on the counting level, was slightly worse than that of raw cow's milk (valued in the interval > 50 Individual Bacterial Cell (IBC)·µL^-1). In routine procedure, if preceding samples had counts > 20 000 IBC·µL^-1, then this was observed to increase the count of the following sample significantly in many cases ("carry-over"). Bactoscan counts were moderately enhanced with increasing numbers of somatic cells in sheep's milk. However, this trend was indicated only in samples with lower plate counts (< 10⁵ colony-forming units (CFU)·mL^-1). The regression equation between the results of the anchor plate method and the Bactoscan method was computed from the sample set which represented sheep's milk production in Slovakia during 2004 (data between percentiles 1 and 99, n = 877): log₁₀ CFU·mL^-1 = 1.088 log₁₀ IBC·µL^-1 + 2.292; with an accuracy of the estimate, expressed as standard deviation of regression s_y,x = 0.305 log₁₀ CFU·mL^-1. The actual regression for raw cow's milk was verified, introducing both raw cow's milk samples and raw sheep's milk samples. The transformation of IBC·µL^-1 to CFU·mL^-1 realised by various published conversions was evaluated by testing of the parallelism of the regression lines and also by comparison of obtained differences on a model data set. The conclusions support the requirement to set up a special conversion for the intended field of application at any time.

Résumé
L'application de la cytométrie de flux pour déterminer la qualité bactériologique du lait cru de brebis en Slovaquie. Dans cette étude, la numération des cellules bactériennes a été évaluée dans le lait cru de brebis de grand mélange par la cytométrie de flux automatisée (Bactoscan FC). Les résultats ont été comparés à ceux obtenus sur le lait de vache. La reproductibilité interne au laboratoire augmentait avec le niveau de la numération et était légèrement inférieure à celle obtenue sur lait cru de vache (pour les valeurs > 50 cellules bactériennes individuelles (CBI)·µL^-1). La méthode de routine a montré que si les échantillons précédents avaient un niveau de contamination > 20 000 CBI·µL^-1, cela pouvait fréquemment augmenter significativement les valeurs dénombrées dans l'échantillon suivant ("carry over"). L'augmentation des cellules somatiques dans le lait de brebis entraînait une légère augmentation des valeurs de dénombrements par Bactoscan. Cependant cette tendance n'a été observée que dans les échantillons ayant les plus faibles niveaux de dénombrements sur boîte (< 10⁵ unités formant des colonies (UFC)·mL^-1). L'équation de régression entre les résultats de dénombrements sur boîte et de dénombrements par Bactoscan a été calculée à partir de l'ensemble des échantillons représentant la production du lait de brebis en Slovaquie pendant l'année 2004 (données entre les centiles 1 et 99, n = 877) : log₁₀ UFC·mL^-1 = 1,088 log₁₀ CBI·µL^-1 + 2,292 ; avec une précision de l'estimation, exprimée en écart-type de la régression s_y,x = 0,305 log₁₀ UFC·mL^-1. La régression réelle pour le lait de vache cru a été vérifiée en introduisant à la fois les échantillons du lait de vache cru et ceux du lait de brebis cru. La transformation du CBI·µL^-1 en UCF·mL^-1, réalisée par plusieurs conversions publiées, a été évaluée en testant le parallélisme des courbes de régression ainsi qu'en comparant les différences obtenues avec un ensemble de données modèle. En conclusion, il apparaît nécessaire d'établir une conversion spécifique pour chaque champ d'application envisagé.

Key words: bacteriological quality -- raw sheep's milk -- flow cytometry -- somatic cells

Mots clés : qualité bactériologique -- lait cru de brebis -- cytométrie de flux -- cellule somatique

Correspondence: Martin Tomáska tomaska@vumza.sk


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