Lait 84 (2004) 501-512
DOI: 10.1051/lait:2004018

Correlation between acidic ninhydrin and HPLC methods to evaluate fraudulent addition of whey in milk

Sandra Pereira Fukuda^a, Salvador Massaguer Roig^b and Luiz Francisco Prata<sup>c

a</sup>  Dept. de Inspeção de Produtos de Origem Animal - Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento do Brasil, Caixa Postal 125, 14 780-970 Barretos, São Paulo, Brasil
^b  Dept. de Tecnologia de Alimentos - Fac. de Eng. de Alimentos - Univ. Est. de Campinas, Caixa Postal 6121, 13083-970 Campinas, São Paulo, Brasil
^c  Dept. de Medicina Veterinária Preventiva - Fac. C. Agr. e Vet. - Univ. Est. Paulista, Via de acesso Prof. Paulo Donato Castellane s/n.º 14887-900 Jaboticabal, São Paulo, Brasil

(Received 2 September 2003 - Accepted 2 April 2004 / Published online: 4 August 2004)

Abstract - The acidic ninhydrin spectrophotometric method (ANSM) for quantitative determination of free and bound sialic acid of milk glycoprotein has been proved to be fast and efficient for routine detection of fraudulent addition of rennet whey to fluid milk. In this research the ANSM was compared with the high performance liquid chromatography (HPLC) method, internationally recommended for caseinomacropeptide (CMP) determination, which besides its high accuracy is more sophisticated and requires trained personnel. For several sample conditions (raw milk and milk with variable added amounts of rennet cheese whey), the methods showed an excellent linear correlation, with r = 0.981 when milk was deproteinized with a 120 g·L^-1 final concentration of trichloroacetic acid (TCA) concentration. The best correlations could be seen with final concentrations of 100 g·L^-1 and 80 g·L^-1 TCA; respectively, r = 0.992 and 0.993.

Résumé - Détection de l'addition frauduleuse de lactosérum au lait de consommation : comparaison de la méthode à la ninhydrine acide (détermination de l'acide sialique) avec la méthode HPLC de détermination du CMP. La méthode spectrophotométrique à la ninhydrine acide (ANSM : acidic ninhydrin spectrophotometric method) pour la détermination des formes libres et liées de l'acide sialique s'est avérée être rapide et performante pour la détection en routine de l'addition frauduleuse de lactosérum doux dans le lait de consommation. Dans l'étude réalisée, l'ANSM a été comparée avec la méthode recommandée au niveau international, à savoir la méthode de détermination du caséinomacropeptide (CMP) par HPLC qui est certes très précise mais requiert un équipement sophistiqué et du personnel hautement qualifié. Une excellente corrélation linéaire a été trouvée entre les deux méthodes lors de l'analyse de filtrats TCA (acide trichloroacétique) issus d'échantillons de lait cru additionnés de quantités variables de lactosérum doux soumis préalablement à un traitement thermique. Selon la concentration finale en TCA : 120 g·L^-1, 100 g·L^-1, 80 g·L^-1, les valeurs de corrélation linéaire atteignaient respectivement 0,981, 0,992 et 0,993.

Key words: Milk / adulteration / whey / addition / acidic ninhydrin / HPLC

Mots clés : Lait / fraude / lactosérum / addition / ninhydrine acide / HPLC

Corresponding author: Salvador Massaguer Roig salvador@fea.unicamp.br

© INRA, EDP Sciences 2004