Purification and characterization of a proteinaceous compound from Pseudomonas fluorescens ATCC 948 with inhibitory activity against some Gram-positive and Gram-negative bacteria of dairy interest.

Abstract - A proteinaceous antimicrobial compound from Pseudomonas fluorescens ATCC 948 was purified to homogeneity by chromatography steps and characterized. The compound showed a large spectrum of activity. Inhibition of thermophilic Lactobacillus, Listeria monocytogenes, Enterobacteriaceae and P fluorescens strains was mainly detected. The antimicrobial compound produced in skim milk had an apparent molecular mass of 67 kDa. was quite heat-stable (80 °C for 15 min), insensitive to lipase and a-amylase, and completely inactivated by treatment with proteolytic enzymes. A bactericidal mode of action was detected against Lactobacillus fermentum D13 chosen as indicator strain. P fluorescens ATCC 948 was not sensitive to the antimicrobial compound produced by itself. The production of the proteinaceous substance started in the early exponential phase of growth, and was highest after 72 h of incubation at 20 °C and pH 6.5. Some considerations about the nature of the antimicrobial compound are given.

Résumé - Purification et caractérisation d'une substance protéinique par Pseudomonas fluorescens ATCC 948, avec activité d'inhibition contre certaines bactéries Grain positives et Gram négatives d'intérêt laitier.
Une protéine présentant une activité antimicrobienne a été produite par Pseudomonas fluorescens ATCC 948. Elle a été purifiée jusqu'à homogénéité par chromatographie et caractérisée. Elle présente un large spectre d'activité et une inhibition contre certaines souches de Lactobacillus thermophiles, contre Listeria monocytogenes, Enterobacteriaceae et des souches de P fluorescens. Le composé antimicrobien produit dans du lait écrémé présente un poids moléculaire apparent de 67 kDa, est suffisamment thermostable (80 °C pendant 15 minutes), pas sensible à la lipase et à l'a-amylase, mais est complètement inactivé par traitement aux enzymes protéolytiques. Son mode d'action bactéricide a été déterminé contre Lactobacillus fermentum D13, choisi comme souche-témoin. P fluorescens ATCC 948 n'est pas sensible au composé antimicrobien produit par lui-même. La production de cette substance protéinique a commencé pendant la première phase de développement exponentiel, et a été la plus importante après 72 heures d'incubation à 20 °C et pH 6,5. Quelques considérations concernant la nature du composé protéinique ont été proposées.