Free Access
| Issue |
Lait
Volume 80, Number 2, March-April 2000
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|---|---|---|
| Page(s) | 267 - 276 | |
| DOI | https://doi.org/10.1051/lait:2000125 | |
DOI: 10.1051/lait:2000125
Effect of bile on the
Lait 80 (2000) 267-276
Effect of bile on the 
-galactosidase activity
of dairy propionibacteria
Gabriela Záratea - Silvia Gonzaleza,b - Adriana Pérez Chaiaa,b - Guillermo Olivera
aCentro de Referencia para Lactobacilos (CERELA), Chacabuco 145,
4000 San Miguel de Tucumán, Argentina
bFacultad de Bioquímica, Química y Farmacia, Universidad Nacional de Tucumán,
Ayacucho 491, 4000 San Miguel de Tucumán, Argentina
(
Abstract:
In the present study, the effect of bile on the growth, cell
permeabilization and -galactosidase activity of dairy propionibacteria was
determined. Two groups of strains with different behavior in media with oxgall
(dehydrated fresh bile) could be observed, and were named bile-tolerant and non
bile-tolerant groups. The -galactosidase activity of bile-tolerant strains
increased during the growth in media containing 0.15 and 0.30% oxgall. The
incubation of cell suspensions in phosphate buffer with oxgall increased the
-galactosidase activity of all the studied strains. They were permeabilized by
bile, permitting more substrate to enter the cells to be hydrolyzed by
-galactosidase. A higher specific activity was observed in cell-free extracts
obtained from cultures in media with oxgall, indicating increased enzyme synthesis
in the presence of bile. The enzyme activity was also increased by sodium
taurocholate and sodium chloride. These results suggest that bile-tolerant strains
of propionibacteria can provide meaningful -galactosidase activity by
permeabilization of the cells and increased enzyme synthesis during growth in the
gut. The non bile-tolerant strains did not grow in media with bile. They were
permeabilized, but their -galactosidase was inactivated when they were exposed for
a long time to bile in the growth media. Thus, their contribution to the
-galactosidase activity in the gut does not appear to be significan
-galactosidase activity of dairy propionibacteria was
determined. Two groups of strains with different behavior in media with oxgall
(dehydrated fresh bile) could be observed, and were named bile-tolerant and non
bile-tolerant groups. The -galactosidase activity of bile-tolerant strains
increased during the growth in media containing 0.15 and 0.30% oxgall. The
incubation of cell suspensions in phosphate buffer with oxgall increased the
-galactosidase activity of all the studied strains. They were permeabilized by
bile, permitting more substrate to enter the cells to be hydrolyzed by
-galactosidase. A higher specific activity was observed in cell-free extracts
obtained from cultures in media with oxgall, indicating increased enzyme synthesis
in the presence of bile. The enzyme activity was also increased by sodium
taurocholate and sodium chloride. These results suggest that bile-tolerant strains
of propionibacteria can provide meaningful -galactosidase activity by
permeabilization of the cells and increased enzyme synthesis during growth in the
gut. The non bile-tolerant strains did not grow in media with bile. They were
permeabilized, but their -galactosidase was inactivated when they were exposed for
a long time to bile in the growth media. Thus, their contribution to the
-galactosidase activity in the gut does not appear to be significan
Keywords:
Propionibacteria / bile tolerance / -galactosidase
Résumé:
Effet de la bile sur l'activité -galactosidase de bactéries propioniques
laitières. Dans la présente étude, l'effet de la bile sur la croissance, la
perméabilisation cellulaire et l'activité -galactosidase de bactéries propioniques
laitières a été déterminé. Deux groupes de souches ayant des comportements
différents dans des milieux supplémentés en oxgall (bile fraîche déshydratée)
pouvaient être observés et ont été appelés l'un bile-tolérant et l'autre bile
non-tolérant. L'activité -galactosidase des souches bile-tolérantes augmentait au
cours de la croissance dans les milieux contenant 0,15 et 0,30 % d'oxgall. L'incu-
bation des suspensions cellulaires dans un tampon phosphate avec oxgall augmentait l'activité-galactosidase pour toutes les
souches étudiées. Elles étaient perméabilisées par la bile, permettant à plus de
substrat d'entrer dans les cellules et d'être hydrolysé par la -galactosidase. Une
activité spécifique plus élevée était observée dans les extraits intracellulaires
obtenus à partir de cultures dans les milieux supplémentés en oxgall, indiquant une
synthèse enzymatique accrue en présence de bile. L'activité enzymatique était
également augmentée par le taurocholate de sodium et le chlorure de sodium. Ces
résultats suggèrent que les souches bile-tolérantes de bactéries propioniques
peuvent produire une activité significative de -galactosidase par perméabilisation
des cellules et synthèse accrue d'enzyme pendant la croissance dans l'intestin. Les
souches bile non-tolérantes ne croissaient pas dans les milieux avec bile. Elles
étaient perméabilisées, mais leur -galactosidase était inactivée quand elles
étaient exposées pendant longtemps à la bile dans les milieux de croissance. Leur
contribution à l'activité -galactosidase dans l'intestin pourrait donc être
négligeable.
-galactosidase de bactéries propioniques
laitières. Dans la présente étude, l'effet de la bile sur la croissance, la
perméabilisation cellulaire et l'activité -galactosidase de bactéries propioniques
laitières a été déterminé. Deux groupes de souches ayant des comportements
différents dans des milieux supplémentés en oxgall (bile fraîche déshydratée)
pouvaient être observés et ont été appelés l'un bile-tolérant et l'autre bile
non-tolérant. L'activité -galactosidase des souches bile-tolérantes augmentait au
cours de la croissance dans les milieux contenant 0,15 et 0,30 % d'oxgall. L'incu-
bation des suspensions cellulaires dans un tampon phosphate avec oxgall augmentait l'activité
-galactosidase pour toutes les
souches étudiées. Elles étaient perméabilisées par la bile, permettant à plus de
substrat d'entrer dans les cellules et d'être hydrolysé par la -galactosidase. Une
activité spécifique plus élevée était observée dans les extraits intracellulaires
obtenus à partir de cultures dans les milieux supplémentés en oxgall, indiquant une
synthèse enzymatique accrue en présence de bile. L'activité enzymatique était
également augmentée par le taurocholate de sodium et le chlorure de sodium. Ces
résultats suggèrent que les souches bile-tolérantes de bactéries propioniques
peuvent produire une activité significative de -galactosidase par perméabilisation
des cellules et synthèse accrue d'enzyme pendant la croissance dans l'intestin. Les
souches bile non-tolérantes ne croissaient pas dans les milieux avec bile. Elles
étaient perméabilisées, mais leur -galactosidase était inactivée quand elles
étaient exposées pendant longtemps à la bile dans les milieux de croissance. Leur
contribution à l'activité -galactosidase dans l'intestin pourrait donc être
négligeable.
Mots clé :
Propionibacterium / tolérance à la bile / -galactosidase
Correspondance et tirés à part : Adriana Pérez Chaia
Fax: (54) 81 310465; apchaia@cerela.org.ar
Copyright INRA, EDP Sciences