Lait 78 (1998) 391-400
DOI: 10.1051/lait:1998438

Rapid separation of bovine whey proteins by membrane convective liquid chromatography, perfusion chromatography, continuous bed chromatography, and capillary electrophoresis

Jean-Michel Girardet^a, Franck Saulnier^b, Guy Linden^a and Gérard Humbert<sup>a

a</sup>  Laboratoire des biosciences de l'aliment, unité associée à l'Inra, Faculté des sciences, université Henri-Poincaré Nancy I, BP 239, 54506 Vandoeuvre-lès-Nancy cedex, France
^b  Service commun de séquences des protéines. Faculté des sciences, université Henri-Poincaré Nancy I. BP 239, 54506 Vandoeuvre-lès-Nancy cedex, France

(Received 19 September 1997; accepted 26 November 1997)

Abstract - Membrane convective liquid chromatography is a technique based on porous cellulose membranes designed for the separation of biomolecules in few minutes at high flow-rates and low back-pressures. Bovine whey proteins are separated in less than 10 min, at pH 8.5, with a flow-rate of 5.6 mLmin^-1 and with a 0-0.2 mol-L^-1 NaCl linear gradient. Three other rapid methods are also proposed. Wim the ion-exchange perfusion liquid chromatography based on beads with large pores and with the continuous bed chromatography based on a polymer matrix, separations are achieved in only 10 min. Capillary zone electrophoresis using an untreated fused-silica capillary allows the separation of whey proteins in a single run of 8 min without the presence of polymeric additives. These rapid methods are suitable in the quality control of wheys and could be applied in dairy industry or in research. © Inra / Elsevier, Paris

Résumé - Séparation rapide des protéines du lactosérum bovin par chromatographie liquide sur membranes à flux convectif, par chromatographie par perfusion, par chromatographie en lit continu et par électrophorèse capillaire
La chromatographie liquide sur membranes à flux convectif est une technologie utilisant des membranes de cellulose poreuses destinées à la séparation des biomolécules en quelques minutes à des débits élevés et des contre-pressions faibles. Les protéines du lactosérum bovin sont bien séparées en moins de 10 min à pH 8,5, avec un débit de 5,6 mL-min^-1 et un gradient linéaire de 0 à 0,2 mol-L^-1de NaCl. Trois autres méthodes rapides sont également proposées. La chromatographie d'échange d'ions par perfusion, utilisant des billes à larges pores, et la chromatographie en lit continu utilisant une matrice polymérisée donnent des séparations bien résolues en seulement 10 minutes. L'électrophorèse capillaire utilisant un capillaire en silice fondue non traité permet de séparer les protéines lactosériques principales en une seule étape et en 8 minutes, sans adjonction de polymères. Ces méthodes rapides sont idéales pour le contrôle de la qualité des lactosérums et pour l'étude de l'hydrolyse ou de l'agrégation des protéines lactosériques. © Inra / Elsevier, Paris

Key words: membrane liquid chromatography / MCLC / perfusion chromatography / continuous bed chromatography / capillary electrophoresis / whey protein

Mots clés : chromatographie liquide sur membranes / MCLC / chromatographie par perfusion / chromatographie en lit continu / électrophorèse capillaire / protéine de lactosérum

Corresponding author: Jean-Michel Girardet Jean-Michel.Girardet@scbiol.u-nancy.fr