Lait 71 (1991) 493-499
DOI: 10.1051/lait:1991437

Microparticle-enhanced nephelometric immunoassay for immunoglobulins G in cow's milk

P. Montagne^{a, b}, C. Gavriloff^a, G. Humbert^c, ML Cuillière^{a, d}, J. Duheille^a and G. Linden<sup>c

a</sup>  Faculty of Medicine, Immunology Laboratory, BP 184, 54505 Vandoeuvre-lès-Nancy
^b  INSERM
^c  Faculty of Sciences, Laboratory of Applied Biochemistry associated with INRA, BP 239, 54506 Vandoeuvre-lès-Nancy, France
^d  CNRS

(Received 26 November 1990; accepted 15 April 1991)

Abstract - A microparticle-enhanced nephelometric immunoassay of bovine immunoglobulins G is reported. It is based on the nephelometric quantification of the competitive immunoagglutination of covalently coated microparticles. This new immunoassay is easy to perform (1 -step, no sample pre-treatment, no washing or phase separation), fast (1 h at most), sensitive (8 μg / l of immunoglobulins G significantly detected in the reaction mixture), accurate (linear recovery of immunoglobulins G in overloaded milks) and reproducible (CVs from 2.3-10% in within- and between-run precision studies). The potential of this microparticle-based immunoassay is discussed with regard to the other quantitative immunoassays (radial immunodiffusion and conventional immunonephelometry in particular) used in the determination of milk immunoglobulins G.

Résumé - Dosage des immunoglobulines G dans le lait de vache par Immunonéphélémétrie sur support microparticulaire
Les immunoglobulines G sont dosées dans le lait de vache par immunonéphélémétrie sur support microparticulaire. Des microsphères spécialement synthétisées comme support de la réaction antigène anticorps et sensibilisées par des gamma-globulines bovines sont agglutinées par un antisérum anti-immunoglobulines G. La mesure de la lumière dispersée par les agglutinats, à l'aide d'un néphélémètre adapté, quantifie cette agglutination et son inhibition par des immunoglobulines G libres, permettant ainsi leur dosage. Celui-ci est simple (une seule étape sans prétraitement des échantillons, sans lavage ni séparation), rapide (1 h maximum), sensible (seuil de détection : 8 μg / l dans le milieu de réaction), exact (récupération linéaire des immunoglobulines G dans des laits surchargés) et reproductible (CVs compris entre 2,3% et 10,0%). Les potentialités de cette nouvelle méthode de dosage des immunoglobulines G dans le lait de vache sont discutées par comparaison aux autres méthodes immunologiques (notamment l'immunodiffusion radiale et la néphélémétrie classique) déjà utilisées.

Key words: immunoassay / immunonephelometry / microparticle / milk / immunoglobulins G

Mots clés : immunodosage / immunonéphélémétrie / microparticule / lait / Immunoglobulines G