Lait 71 (1991) 359-370
DOI: 10.1051/lait:1991328

Extracellular proteinases from Micrococcus GF: I. Factors affecting growth and production

G.D. Garcia de Fernando^{a, b} and P.F. Fox<sup>a

a</sup>  Department of Food Chemistry, University College, Cork, Ireland
^b  Correspondence and reprints: Departamento de Higiene y Tecnologia de los Alimentas, Facultad de Veterinaria, 28040 Madrid, Spain

(Received 19 September 1990; accepted 30 January 1991)

Abstract - The optimum temperature for growth of and extracellular proteinase production by Micrococcus GF was 30 °C. Growth was more rapid and proteolytic activity was enhanced by aeration. The microorganism grew and was able to produce extracellular proteinase on casaminoacids, gelatin, phytone peptone, glutamic acid and glutamine, but not on the other amino acids as the sole carbon / nitrogen source. Proteolytic activity decreased after the early exponential phase when Micrococcus GF was grown either on 1% casaminoacids or 1% gelatin, but not when grown on casaminoacids plus gelatin or phytone peptone. NH₄Cl had an inhibitory effect on growth rate, but it affected neither the proteolytic activity nor the final bacterial count when the microorganism grew on organic N plus NH₄Cl. When Micrococcus GF was grown at different phytone peptone concentrations, the shortest generation time was observed with 2% phytone peptone; proteolytic activity was constant in the range 1-2% phytone peptone. Glucose and maltose did not affect proteinase production, but the generation time was increased by ≥1% glucose. Maltose had a slight inhibitory effect on growth as well as on proteinase production. Addition of NaCl to the culture medium supressed proteinase production by Micrococcus GF. The shortest generation time was observed in 2% NaCl, and the microorganism was able to grow in phytone peptone broth (2%) containing 12%, but not 14% NaCl.

Résumé - Protéinases extracellulaires de Micrococcus GF : 1. Facteurs affectant la croissance et la production
La température optimale observée pour la croissance de Micrococcus GF et la production de protéinase extracellulaire est de 30 °C. Une aération augmente la croissance et stimule l'activité protéolytique. Le microorganisme se développe et produit une protéinase extracellulaire sur des sources azotées telles que acides aminés, gélatine, peptone phytone, acide glutamique, glutamine. Il n'y a pas croissance lorsque on utilise une source unique de carbone / azote. Quand Micrococcus GF est cultivé sur une source d'acides aminés à 1% ou de la gélatine 1%, l'activité protéolytique est réduite après la phase exponentielle précoce alors que ce n'est pas le cas sur d'autres sources d'acides aminés additionnés de gélatine ou de peptone phytone. Sur milieu organique azoté, le taux de croissance de Micrococcus GF est inhibé par NH₄Cl, mais ce dernier n'affecte ni l'activité protéolytique ni le dénombrement final des bactéries.
En faisant varier la concentration en peptone phytone, le temps de génération de Micrococcus était le plus court avec une concentration de 2%. L'activité protéolytique était constante avec la peptone phytone de 1 à 2%.
Le glucose et le maltose n'affectent pas la production de protéinase. Cependant quand la concentration de glucose était supérieure à 1%, le temps de génération augmentait et le maltose avait un léger effet inhibiteur aussi bien sur la croissance que sur la production de protéinase. L'addition de NaCl au milieu de culture réprime la production de protéinase par Microccocus GF. Le temps de génération le plus court était observé avec NaCl 2% et le microorganisme était capable de croître dans un bouillon de peptone phytone (2%) contenant NaCl 12% (et non NaCl 14%).

Key words: Micrococcus / growth / extracellular proteinase production

Mots clés : Micrococcus / croissance / production de protéinase extracellulaire