Purification and characterization of a proline iminopeptidase from Propionibacterium shermanii 13673

Abstract - A proline iminopeptidase activity was found in P shermanii 13673. The enzyme activity was present in the intracellular fraction. The peptidase was purified approximately 80 times by ion-exchange chromatography on Fractogel TSK DEAE 650 and gel filtration on Sephacryl S-100 HR. The purified enzyme appeared as a single band after sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis. It had a molecular weight of 61 000. Optima for activity of the purified enzyme were 40 °C and pH 8.0. The enzymatic activity was inhibited by phenylmethylsulfonylfluoride (1 mM). Divalent ions Zn, Co, Cu and Fe also had an inhibitory effect. The peptidase hydrolyzed specifically Pro p-NA amino acid, dipeptides Pro-Met, Pro-Phe, Pro-Le, Pro-Ileu, Pro-Gly and β-casomorphin des-Tyr fragment 7.

Résumé - Purification et caractérisation d'une proline iminopeptidase à partir de la souche Propionibacterium shermanii 13673
Une activité de proline iminopeptidase a été mise en évidence dans la souche P shermanii 13673. L'activité enzymatique est présente dans la fraction intracellulaire. L'enzyme a été purifiée environ 80 fois par chromatographie d'échange d'ions sur fractogel TSK DEAE 650 et gel filtration sur Sephacryl S-100 HR. L'enzyme purifiée présente une seule bande après électrophorèse en gel de polyacrylamide et en présence de SDS. Elle a un poids moléculaire de 61 000. La température est de 40°C et le pH optimal de 8,0. L'activité enzymatique est inhibée par le phénylméthylfulfonyl fluoride (1 mM). Les ions divalents Zn, Co, Cu et Fe ont aussi un effet inhibiteur. La peptidase hydrolyse spécifiquement la Pro p-NA, les dipeptides Pro-Met, Pro-Phe, Pro-Leu, Pro-lle, Pro-Gly et le fragment 7 des-Tyr de la β-casomorphine.