Estimation par conductimétrie de la flore aérobie mésophile, des bactéries conformes et de la flore psychrotrophe du lait cru

Abstract - Estimation of total aerobic mesophilic flora, coliform bacteria and psychrotrophic flora in raw milk by conductimetry
A series of 130 raw milk samples ranging from 10⁴ to 6.6 x 10⁷ CFU / mL were analysed in duplicate by conductimetry with the Microbiological Growth Analyser AT Malthus, using the following experimental conditions: in 2 mL cells on Spye Broth at 30 °C (DT 30 °C), on Spye Broth at 10 °C (DT 10 °C), on Spye Broth supplemented with crystal violet (2 mg / l) at 30 °C (DTCV) and in 10 mL cells on Coliform Broth at 30 °C (TD Coli). Using the Spiral Plate Maker, they have also been submitted to the enumeration of total flora after a standard shaking (TFSS) or after shaking with an Ultra-turrax for 30 s at 20 000 rpm (TFUT); coliform bacteria and psychrotrophic flora have been enumerated only after shaking with an Ultra-turrax. With an 0.1 mL inoculation volume in cells, the coefficient of correlation between the logarithms of the numbers of CFU / mL (TFSS) and the detection times DT 30 °C is - 0.822 and the residual standard deviation of the regression line Reference on TD 30 °C is 0.386 log (CFU / mL). This accuracy decreases with an inoculation volume of 1 mL in cells [s_{y, x} = 0.452 log (CFU / mL)] or with the shaking of samples with an Ultra-turrax before plating [s_{y, x} = 0.467 log (CFU / mL)]. The coefficient of correlation between the numbers of coliforms (in log) and the detection times TD Coli is - 0.823 and the residual standard deviation of the regression line Reference on DT Coli is 0.424 log (CFU / mL). For the psychrotrophic flora, these parameters are respectively ( - 0.667 and 0.640 log CFU / mL) for the regression between the numbers of CFU / mL (in log) and the detection times DT CV, and respectively - 0.945 and 0.287 log (CFU / mL) for the regression between the numbers of CFU / mL (in log) and the detection times DT 10 °C. Whatever the microbial group, the repeatability relative standard deviation of the detection times (in h) averages 2 to 4% and is constant at the various levels of milk contamination. Expressed in CFU / mL from the slope of the regression line, the repeatability standard deviation becomes proportionally higher as the level of milk contamination decreases. For total flora, the geometric relative standard deviation of repeatability averages 35.9% and is over 40% for the low levels of contamination (< 10⁵ CFU / mL).

Résumé - Cent trente échantillons de lait cru contenant entre 10⁴ et 6,6.10⁷ UFC / mL ont été analysés en double, par conductimétrie par le Microbiological Growth Analyser AT Malthus, selon les conditions expérimentales suivantes : en cellules de 2 mL sur Spye Broth à 30 °C (TD 30 °C), sur Spye Broth à 10 °C (TD 10 °C), sur Spye Broth additionné de 2 mg / l de cristal violet à 30 °C (TD CV) et en cellules de 10 mL sur Coliform Broth à 30 °C (TD Coli). Ils ont également été soumis à la numération de la flore totale après agitation standard (FTAS) et après agitation pendant 30 s à l'aide d'un Ultra-turrax tournant à 20 000 t / min (FTUT); les bactéries conformes et les micro-organismes psychrotrophes ont été dénombrés uniquement après agitation par Ultra-turrax. Tous les ensemencements ont été effectués à l'aide de l'ensemenceur Spiral. Avec un inoculum de 0,1 mL de lait dans les cellules, le coefficient de corrélation entre le logarithme du nombre d'UFC / mL (FTAS) et le temps de détection TD 30 °C est de -0,822 et l'écart type résiduel de la régression Référence sur TD 30 °C de 0,386 log (UFC / mL). Cette précision se dégrade de façon significative avec un inoculum de 1 mL de lait [s_y,x = 0,452 log (UFC / mL)] ou si les numérations ont été effectuées après une agitation par Ultra-turrax [s_y,x = 0,467 log (UFC / mL)]. Le coefficient de corrélation entre le logarithme du nombre de conformes et le temps de détection sur Coliform Broth TD Coli est de - 0,823 et l'écart type résiduel de la régression Référence sur TD Coli de 0,424 log (UFC / mL). Pour la flore psychrotrophe, ces paramètres sont respectivement de - 0,667 et de 0,640 log (UFC / mL) pour la régression entre le nombre d'UFC / mL (en log) et le temps de détection TD CV et respectivement de - 0,945 et de 0,287 log (UFC / mL) pour la régression entre le nombre d'UFC / mL (en log) et le temps de détection TD 10 °C. Quel que soit le groupe microbien, l'écart type relatif de répétabilité des temps de détection (en h) est faible (2-4%) et constant à tous les niveaux de contamination du lait. Par contre, après conversion en UFC / mL à partir de la pente de la droite de calibrage, l'écart type de répétabilité augmente quand le niveau de contamination du lait baisse. Pour la flore totale, l'écart type relatif géométrique de répétabilité est en moyenne de 35,9% et dépasse 40% au-dessous de 10⁵ UFC / mL.