Lait 68 (1988) 177-187
DOI: 10.1051/lait:1988212

Characterization of a L-serine dehydratase activity from Streptococcus faecalis

Marta E. FARIAS^a, Marta E. FARIAS^b, Ana M. STRASSER de SAAD^{a, c}, Aida A. PESCE de RUIZ HOLGADO^{a, c} and G. OLIVER<sup>a, c

a</sup>  CERELA, Centre de Referencia para Lactobacilos, Chacabuco 145, 4000 Tucuman, Argentina and Facultad de Bioquimica, Quimica y Farmacia, Universidad Nacional de Tucuman, Argentina
^b  Fellow of the Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Técnicas (CONICET), Argentina
^c  Career Investigator of Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Técnicas (CONICET), Argentina

Abstract - Streptococcus faecalis sp. produces pyruvate and ammonia from L-serine via a specific L-serine dehydratase. The apparent Michaelis constant for L-serine is 50 mM and the Vmax is 142 nmol of pyruvate formed per minute and per mg of protein. Maximum enzymatic activity is observed at 40 °C and pH 8 in 100 mM phosphate buffer. L-serine is the sole substrate. D-serine, L-threonine and glycine are competitive inhibitors, L-cysteine acts as a non-competitive inhibitor.
The enzyme seems to be a very labile protein; it is inactivated by dilution, dialysis and temperature. Pyridoxal phosphate is not required for maximum activity.
L-serine dehydratase is strongly inhibited by Cu²⁺, Zn²⁺, Hg²⁺, p-chloromercuribenzoate, Tris, borate and acetate. The enzymatic activity is stimulated by Fe²⁺ ions.

Résumé - Caractérisation d'une activité L-sérine déshydratase de Streptococcus faecalis
Streptococcus faecalis sp. produit du pyruvate et de l'ammoniac par une L-sérine déshydratase spécifique, à partir de L-sérine.
La constante apparente de Michaelis pour la L-sérine est de 50 mM et la vitesse maximum de 142 nmoles de pyruvate formé par minute et par mg de protéine. L'activité enzymatique est maximum à 40 °C et à pH 8 dans du tampon phosphate 100 mM.
La L-sérine est le seul substrat de la réaction. La D-sérine, la L-thréonine et la glycine sont des inhibiteurs compétitifs. La L-cystéine est un inhibiteur non-compétitif.
L'enzyme semble être une protéine très labile ; elle est inactivée par dilution, dialyse et par la température.
Le pyridoxal phosphate n'est pas exigé pour obtenir une activité maximum.
La L-sérine déshydratase est fortement inhibée par les ions Cu²⁺, Zn²⁺ et Hg²⁺ et par le P-chloromercuribenzoate. L'activité est aussi inhibée par les tampons Tris, borate et acétate.
L'ion Fe²⁺ a un effet stimulant sur l'activité enzymatique.

Key words: Streptococcus faecalis / L-serine dehydratase / Serine catabolism

Mots clés : Streptococcus faecalis / L-sérine déshydratase / Catabolisme de la sérine