Séparation chromatographique de peptides issus de l'hydrolyse enzymatique de protéines de lactosérum et de caséines

Abstract - Chromatographic separation of peptides stemming from splitting of whey proteins and caseins
By chromatographic fractionation of peptides from milk proteins, on an anion-exchange support, two fractions (I and II) were obtained. This separation was carried out on whey peptides, casein peptides, peptides with or without organic phosphorus and caseinomacropeptides.
The peptides of the second fraction were eluted in reverse phase chromatography in the most hydrophobic zone of the gradient. Fraction II contained peptides with a low isoelectric pH which were also the longest peptides, confirmed by chromatography HPLC of exclusion.
Most of the minerals of the initial peptide mixtures (Ca²⁺, Mg²⁺, Na⁺, K⁺) were eluted in the first fraction.
Fraction II from the phosphopeptides was enriched in phosphorus; its content was 4 times higher than the initial phosphopeptide solution.
The content in N-acetylneuraminic acid of fraction II of caseinomacropeptides was increased by 40 % in comparison with the initial mixture.

Résumé - Un fractionnement de peptides issus de l'hydrolyse enzymatique en réacteur à membranes des différentes protéines laitières est réalisé par chromatographie frontale, technique facile à mettre en oeuvre à grande échelle et de faible coût économique.
Deux fractions (I et II) sont obtenues sur support échangeur d'anions à partir des peptides de lactosérum, des peptides de caséines, des peptides phosphorylés, des peptides non phosphorylés et des caséinomacropeptides.
Les peptides de la fraction II sont élués en chromatographie CLHP en phase inverse dans la zone la plus hydrophobe du gradient. Cette fraction contient les peptides de pH isoélectriques les plus bas. Les analyses en chromatographie CLHP d'exclusion montrent que ce sont également les plus longs, ce qui expliquerait leur élution tardive en chromatographie phase inverse.
Les minéraux présents dans les mélanges initiaux (Ca²⁺, Mg²⁺, Na⁺, K⁺) sont élués dans les premières fractions.
La fraction II issue des phosphopeptides est très enrichie en phosphore ; sa teneur est 4 fois supérieure à celle de la solution phosphopeptidique initiale.
La fraction II des caséinomacropeptides s'est accrue de 40 % en acide N-acétylneuraminique par rapport au mélange initial.